Waters Styragel色譜柱的組安裝

本章包括：

■ GPC/HPLC系統準備

■ 色譜柱安裝

■ 維修損壞的壓力螺釘組件

■ 色譜柱平衡

a. GPC/HPLC系統準備

將色譜柱連接到GPC/HPLC系統的流路之前，必須預先調試好系統：

1. 通過用零死體積接頭替換舊色譜柱，直接將系統進樣器連接到檢測器。

2. 將系統切換至用于保存色譜柱的溶劑。對于新的色譜柱組，該溶劑為出廠溶劑。

3. 沖洗系統以除去所有微粒和舊的溶劑。依應用需求沖洗進樣器定量環。

譜帶展寬

所有色譜系統中的連接管路和接頭都會導致柱外譜帶展寬。安裝色譜柱之前，必須確定系統的儀器譜帶展寬（參見測試儀器譜帶展寬部分）。如果此項測試不適用于您的系統，請參閱系統操作員手冊。

用于4.6 mm節約溶劑色譜柱的窄內徑色譜系統窄內徑系統的峰體積非常小，這對于譜帶展寬最小化至關重要。所有連接都盡可能采用最短的管路。無需在檢測器中使用微內徑流通池或以任何方式更改您的傳統HPLC系統。整個系統中須采用0.009英寸（0.25 mm）內徑的管路。

b.色譜柱安裝

串聯色譜柱時，使用色譜柱各自隨附的0.009英寸0.25 mm內徑的U形色譜柱連接管。

色譜柱排列連接順序一般情況下，分析結果與色譜柱組的排列順序無關。但是，為了提高分離度并延長色譜柱壽命，請按照孔徑依次減小的順序排列色譜柱，推薦的接法是使孔徑最大的色譜柱最靠近進樣器。原因在于：

■ 孔徑越大的色譜柱越穩定且越能夠耐受外來物質的積累。

■ 樣品中分子量最大的物質對樣品的粘度影響最大。如果先分離分子量最大的物質，那么粘度的下降速度會更快，色譜柱組的壓力將會更小。對于超高分子量的聚合物，這種分離順序有利于減小樣品的剪切效應。

色譜柱組安裝

色譜柱的安裝方法：

1. 從每根色譜柱上取下柱端塞，并將柱端塞妥善保存。

2. 將第一根色譜柱連接至進樣器出口管道。確保溶劑流向與色譜柱標簽上箭頭所示的方向一致。用手指擰緊接頭，然后用扳手將接頭再擰1/4圈。

3. 利用色譜柱隨附的U形管將下一根色譜柱連接到前一根色譜柱上。確保溶劑流向與色譜柱標簽上箭頭所示的方向一致。先用手指旋緊U形管的入口和出口接頭，然后用扳手將接頭再擰緊一圈。

4. 重復步驟3，直至連接好所有色譜柱。

5. 按照步驟1至4所述，將最后一根色譜柱連接到檢測器入口。

c.維修損壞的壓力螺釘組件

損壞的壓力螺釘或磨損的錐箍組件的卸載方法：

1. 利用截管器或帶刀刃的銼刀在所選斷點處對管件進行標記。

2. 利用覆有織物的鉗子夾住管件兩側標記處（以防損壞管件表面）。輕輕地來回彎折管件使其在標記處斷開。必須確保管件末端筆直、開口且無毛刺。

3. 依次將壓力螺釘和錐箍（錐體較大的末端朝前）套到管件上。妥善地將管件底部放入接頭座中。如果管件未完全落定，則產生的死體積將導致色譜結果變差。

不同類型的色譜柱，錐箍末端與U形管末端之間的距離可能不同。如果您使用的色譜柱來自另一家制造商，可能需要重置錐箍或添加新的接頭（見圖1）。進樣器與檢測器之間的所有管線均使用0.009英寸（0.25 mm）內徑的管件。對于沃特世色譜柱而言，臨界距離為0.130英寸（2.25 mm）。

d.色譜柱組平衡

色譜柱安裝之后，或存放一段時間后重新使用時，需要對色譜柱進行平衡。平衡色譜柱組的方法：

1. 將泵流速設置為0.0 mL/min，然后打開泵。

2. 每隔15秒將流速增加0.1 mL/min，直至達到最終流速。

3. 用出廠溶劑沖洗色譜柱直至基線穩定。

4.6 mm溶劑節約型色譜柱的流速和反壓為獲得最佳的分離度和最長的色譜柱壽命，請保證各色譜柱的流速不超過0.3 mL/min或反壓不超過3.5 MPa（500 psi，35 atm）。

請注意：色譜柱隨附的《分析證書》中標有推薦流速，但可能高于最優值。為在實驗室中獲得最長的色譜柱壽命，請遵照我們提供的流速和反壓條件。

使用HR 0.5、HR 1和HR 2色譜柱時，須每隔30秒將流速增加0.1 mL/min，直至達到0.3mL/min。

缺損的色譜柱

若串聯色譜柱中一根或多根有缺損，則可能導致整組色譜柱存在缺陷。一根有缺損的色譜柱可能引起譜峰展寬，而這種影響是其它良好的色譜柱所無法彌補的。相關柱效測試條件請參見表4、表5或表6。

初始效率測試

在首次分析之前需要對系統和色譜柱進行測試。使用推薦的系統和色譜柱參數運行測試樣品并記錄結果。這些結果可為之后的性能測試提供比較的基準。有關測定系統和色譜柱效率的步驟，請參閱關于效率測試的部分。

保存這些測試得到的色譜圖。記錄柱效測試的保留時間、系統設置以及所有的實驗條件，以便將來進行比較時能準確重現。